如何选择合适的显微镜照明方法

文章出处：网责任编辑：作者：人气：-发表时间：2015-06-01 14:54:00

显微镜的观察需要的条件也不好，照明方法也有很多种选择，怎么选择一种适合自己的显微镜照明方法呢？现在，让沃德普显微镜跟大家说一下照明方法的种类有哪几种，了解清楚就能选择合适的显微镜照明方法。

照明方法：

1.照明生物组织的透明物体标本：透射照明。

2.照明金属不透明物体标本：反射照明。

常用照明方法有如下几种：

① 临界照明

临界照明的必要条件：

a、把光源的象投射到标本上；

b、亮度亮；

c、灯丝成象明显，照明不均匀。

临界照明虽然不够均匀，但照明亮度亮，因此适用于高倍摄影及荧光显微镜的照明法。

② 库勒照明

库勒照明的必要条件：

a、光源象成象在孔径光阑上；

b、视场光阑成象在标本平面上，控制物视场的大小；

c、通过调节孔径光阑使照明的数值孔径与物镜的数值孔径相匹配；

d、孔径光阑与视场光阑可独立操作。

对于一般使用，库勒照明比较理想，有如下优点：

a、光亮近似自然的白色光；

b、均匀的照明；

c、有排除光晕等有害光线的孔径光阑和视场光阑；

d、不降低分辨率；

e、操作方便。

③ 特殊照明

显微镜除了普通照明方法外，尚有各种特殊照明法，以适应不同的观察对象，最常用的几种简单介绍如下：

一、斜照明法

这种方法是使可变孔径光阑偏离聚光镜中心，此时，被观察标本成象时，在斜照明的倾斜方向所成象，其分辨率高于普通中心照明法一倍，这种方法常用于有方向性的标本观察，为了提高在特定方向上象的分辨率而采用此方法。

这种装置的具体结构是在聚光镜焦面上装有可绕聚光镜轴线旋转又可垂直于光轴移动的可变孔径光阑，利用可变光阑的这二个运动能使其调节至任意方位，以达到标本斜照明的要求，如果此时采用圆形旋转工作台，标本能方便地进行旋转，这对斜照明调节的方便性是有利的。

二、暗场照明法

它是利用强烈光线照射被观察标本，由于标本的微粒及组织的边沿轮廓会产生光线的衍射，显微镜接受这种衍射光进行成象，而照明的直射光线不进入显微镜成象光路，因此，当载玻片中没有标本时，仅有稀少的微小尘埃颗粒时，在视场中可看到黑暗背景中发亮的微小颗粒。

当视场中存在需要观察的标本时，可看到在黑暗背景中发亮的标本轮廓象。使用这种方法可发现极微小的颗粒，其大小要比显微镜分辨率小得多，而这些微粒在明场观察中是不可能看到的。此方法在暗场显微镜中将详细介绍。

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