显微镜的分辨率应该怎样提高？想了解自己所使用的显微镜操作方法是否正确，沃德普仪器官网一切关于显微镜的问题，应有尽有，如果没有您需要解决的问题，可以直接咨询沃德普仪器客服人员，今天沃德普仪器给大家介绍的是怎样提高电子显微镜的分辨率。

 

    显微镜是实验室最重要的设备之一，而评价光学显微镜及电子显微镜性能的重要指标都是分辨率。 

 

1、显微镜的分辨率 

 

    分辨率是指能清楚地分辨两个小点或两线间的最小距离。人眼本身就是一台显微镜，在标准照明条件下，人眼在明视距离（国际公认为25cm）上的分辨率约等于1/10mm。对于观察两条直线来说，由于直线能刺激一系列神经细胞，眼睛的分辨率还能提高一些，这就是显微镜的分划板使用双线对准的原理所在。 

 

    人眼的分辨率只有1/10mm，那么比1/10mm小的物体或比1/10mm近的两个微小物体的距离，人眼就无法分辨了。这时人们开始研制出放大镜和显微镜，显微镜的分辨率定义是指在标本上能清楚分辨的两个小点之间的最小距离。

 

    其计算公式为： D=0.61λ／N.A. 

 

    式中：D为分辨率（μm）；λ为光源波长（μm） ；N.A为物镜的数值口径（也称镜口率）。 

 

2、光学、电子显微镜分辨率的区别及提高 

 

（1）光学显微镜与电子显微镜分辨率的区别

 

    电子显微镜是显微光学一次革命，它使显微光学的最小分辨间距从0.2um提高到0.2~0.3纳米,使人类能够看到一排排原子阵列的晶格结构，从而极大地提高了人类研究微观世界的能力，而光学显微镜和电子显微镜最大分辨率不同的原理是所使用波长不同，前者使用可见光，分辨率最高达0.1微米级，最高放大倍率只能到1600倍左右。后者使用电子，根据物质波波长理论，在几十千伏至几百千伏的电压加速下，可使电子显微镜的分辨率达到纳米级，比光学显微镜的分辨率高千倍。 

 

（2）提高光学显微镜和电子显微镜分辨率的方法 

 

    提高光学显微镜分辨率的方法

 

    根据分辨率的计算公式：D=0.61λ／N.A.，可知提高光学显微镜分辨率的方法有三种：

 

 ①减低波长。可见光最短波长0.39μm，若用0.13μm的紫外线作光源，则会比普通显微镜提高3倍以上。可是由于紫外线显微镜的透镜材料需特殊材质（透过紫外线的材料）制造，加之紫外线显微镜不能用肉眼直接观察，只能通过摄制显微镜照片进行分析，这样就限制了紫外线显微镜的应用。

 

 ②增大折射率。一般显微镜的物镜分为低倍物镜（2×、4×、10×等）、高倍物镜（40×、45×等）、水浸物镜（63×）、油浸物镜（90×、100×）等。低倍物镜也叫干燥系物镜，其介质是空气，折射率是1；水浸物镜介质是蒸馏水，其折射率为1.33；油浸物镜介质是香柏油或其它透明油，其折射率一般在1.52左右，接近透镜和载玻片的折光率。水浸物镜和油浸物镜不仅放大倍数高而且由于使用高折射率的介质，分辨率也高。

 

 ③加大物镜的镜口率来提高分辨力。数值孔径（镜口率）公式为：N.A=n.sinα式中：n—物镜与标本之间的介质析射率；α—物镜的镜口角。如低倍物镜指1×~6×， NA值为0.04~0.15；中倍物镜指6×~25×，NA值为0.15~0.40；高倍物镜指25×~63×，NA值为0.35~0.95；而油浸物镜指90×~100×，NA值可达1.25~1.40。由此可见，那NA值越大，说明显微镜物镜的镜口率越大，D值越小，分辨力越高，物象越清楚。 

 

    如何提高电子显微镜分辨率 

 

    电子显微镜就是利用短光波来提高分 辨力以检视较小物体的。物镜分辨力的高低与造象是否清楚有密切的关系。而目镜没有这种性能，因为目镜只放大物镜所造的象。为此，提高电子显微镜放大率的方法可从以下几个方面考虑：

 

 ①保持良好的加速电压。加速电压不能很低，正常应保持在20~30KV。

 

 ②尽量缩短工作距离。工作距离不能太大，一般保持在5~8mm，以缩短探头接收信号的距离。

 

 ③保持好样品的倾斜度，样品倾斜10~150，使二次电子发射及接收的多。

 

 ④聚光镜放在600~650左右，（数值越大，束斑尺寸越小，分辨率越高）。

 

 ⑤对中良好，保证电子束对中，信号强，亮度好。

 

 ⑥及时更换新的灯丝，使灯丝饱和，束流稳定，并使束流值保持在100~150。

 

 ⑦物镜光阑合轴好（特征点在2000X倍以上时，基本同心聚焦散焦）。

 

 ⑧延长抽真空的时间以提高真空度（一般在30分钟以上基本达到平衡）或检查真空系统的密封状态。

 

 对于提高显微镜分辨率的方法，不同类型的显微镜，方法是不一样的，大家不应该盲目的去按自己认为的方法去操作，应该选择合适的方法，可是很多人并不能清楚的了解自己使用的显微镜操作方法是否正确，这样一来就可能损坏到显微镜，并且减少显微镜的使用寿命，应该怎么办呢？其实不用担心，可以咨询沃德普仪器，沃德普仪器为您提供专业的售前、售中、售后服务，让您舒心、省心。详情可联系沃德普仪器客服人员。